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2004/03/01(月) ..
なんだこのわけの分からない天気は。

あるかりみにぷれっぷ。

To do
1)遠心。
2)その際に、50mlconical tubeに40mlいれて、キャップしたあと、遠心中
にチューブが変形して、漏れるので、キャップしたら、周りをビニールテープで
シールドしてください。
3)step 7ではカートリッジをひっかけに、ひっかける。その際、例のボトルを
使うといい。ごみためとして。Step 8もいっしょ。
4)tipの上にフィルターを重ねて、押す。Step 9。
5)step12の際には回収には15ml conical tubeを使う。
6)step 13の際、つまり、propanolを入れたあと、大変なんだけど、1.5ml
microtubeにすべて均等に分注する。
7)15000rpm x 10min at 4 degree C
8)remove the sup.
9)wash with 500ul of 70% EtOH
10) 15000rpm x 10min at 4 degree C
11) dissolve the pellet with 30-50ul of TE.
12) Measure the concentration of DNA.
(ア) 用意。1)吸光度計のUV lamp switch on。Step10の時に。2)1.5ml
microtubeに98ul のDWを2本分用意。3)1.5ml microtubeに同じDWを500ul位。
3)100-200ml 位のサイズのビーカーなどに50ml位のRO水。
13) Digestion the 100ng of DNA with KpnI 1ulで。Total 10ulの
系。Markerは定量性マーカーで。
14) EP
15) Sequence check and ligtaion to pBac.
16) Plate preparation 10枚くらい。

なんか忙しくなってきたなぁ。uropで基礎実験免除してください:p


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