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2004/03/01(月)
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なんだこのわけの分からない天気は。
あるかりみにぷれっぷ。
To do 1)遠心。 2)その際に、50mlconical tubeに40mlいれて、キャップしたあと、遠心中 にチューブが変形して、漏れるので、キャップしたら、周りをビニールテープで シールドしてください。 3)step 7ではカートリッジをひっかけに、ひっかける。その際、例のボトルを 使うといい。ごみためとして。Step 8もいっしょ。 4)tipの上にフィルターを重ねて、押す。Step 9。 5)step12の際には回収には15ml conical tubeを使う。 6)step 13の際、つまり、propanolを入れたあと、大変なんだけど、1.5ml microtubeにすべて均等に分注する。 7)15000rpm x 10min at 4 degree C 8)remove the sup. 9)wash with 500ul of 70% EtOH 10) 15000rpm x 10min at 4 degree C 11) dissolve the pellet with 30-50ul of TE. 12) Measure the concentration of DNA. (ア) 用意。1)吸光度計のUV lamp switch on。Step10の時に。2)1.5ml microtubeに98ul のDWを2本分用意。3)1.5ml microtubeに同じDWを500ul位。 3)100-200ml 位のサイズのビーカーなどに50ml位のRO水。 13) Digestion the 100ng of DNA with KpnI 1ulで。Total 10ulの 系。Markerは定量性マーカーで。 14) EP 15) Sequence check and ligtaion to pBac. 16) Plate preparation 10枚くらい。
なんか忙しくなってきたなぁ。uropで基礎実験免除してください:p
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